事实上,临床上hpv检测产品众多,由于检测目的基因片段、方法及hpv亚型不同,不同产品的检测结果可以不同。目前,共有4种hpv检测技术通过美国fda认证,用于宫颈癌初筛,即hc2、cervista、bas、aptia,分别于2003年、2009年、2011年4月和2011年10月通过美国fda认证。hc2通过核酸杂交的信号扩大法检测13种高危型hpv(hpv16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68)基因组所有基因片段,即e1、e2、e4、e5、e6、e7、l1、l2、lcr共9个基因片段,由于hc2试验无需初级放大,因此,很少受交叉污染和标本采集因素的影响,而这些因素有时可能对pcr试验和结果造成影响;cervista采用vader——一种用于检测特定核苷酸序列的信号放大法来检测14种高危型hpv(前文13种及66亚型)的l1、e6、e7基因片段;bas采用聚合酶链反应(pcr)的靶扩增法检测上述14种高危型hpvl1基因片段,在美国是惟一经fda批准单独用于宫颈癌初筛的hpv检测技术;aptia采用转录介导扩增(ta)的靶扩增法检测上述14种高危型hpv的e6、e7rna片段。所以,即使是fda认证的hpv检测技术,检测的目的基因片段、方法和亚型也不尽相同,结果也可能不同。
研究表明,65~75的宫颈癌由hpv16和18亚型引起,其他高危型占25~35。因此,hpv16和18亚型相比其他亚型致癌风险更高,这也是fda批准bashpv16、18和非16、18分型检测方法用于25岁以上妇女初筛的重要原因。值得关注的是,不同于前3种hpvdna检测技术,aptia检测目标为hpve6、e7rna。当hpvdna在宿主基因组外复制时,e6、e7rna不表达或低表达,当hpvdna整合进入宿主基因组后,e6和e7癌基因激活,转录水平和蛋白表达升高易导至宫颈病变。近年来,多项大型临床研究表明,aptia检测hpv的灵敏度与hc2、bas相当,而特异度和阳性预测值显著提高。有意义的是,两个独立研究小组分别对细胞学结果异常,进行hpv分流时将aptia和hc2进行比较研究,结果显示,aptia相比hc2减少了21~23的镜转诊率。这意味着在保证宫颈病变检出率不变的前提下,aptia方法的假阳性率更低,从而减少不必要的镜转诊和宫颈活检率。
误区五:hpv是宫颈癌发生的必要条件,hpv阴性者不会发生宫颈癌
临床上,我们会发现hpv阴性者同样可能查出宫颈癌。究其原因,一方面是特殊类型宫颈癌如宫颈微偏腺癌、内膜样癌、浆液性癌、透明细胞癌等可能与hpv感染无关,这类宫颈癌蜡块组织中hpv检测阳性率仅为0~273;另一方面,任何一种hpv检测方法都存在一定假阴性率,这与检测目的基因片段、检测方法及其灵敏度有关。因此,必须清楚地意识到,现有筛查方法尚无法达到100的敏感度和特异度。
误区六:90hpv感染是一过性的,在1~2年内清除
原文来源于美国癌症协会、美国镜和宫颈病理协会以及美国临床病理协会于2012年联合推出的宫颈癌预防和早期筛查指南,依据于以下两篇文献。一篇是2007年发表于jfectdis题为《细胞学asc-s或lsil妇女2年hpv持续感染的前瞻性研究》的论著。该研究纳入美国4个临床中心6个月内5060例涂片筛查提示asc-(3488例)和宫颈低度鳞状上皮内病变(lsil)(1572例)妇女,统计时研究者剔除了所有随访期间诊断为c3或癌症妇女,结论是91((95ci90~92)入组时hpv感染者在24个月内清除。我们认为,剔除所有随访期间诊断为c3或癌症妇女并不正确,原因是入组时已经过较充分的细胞学和组织学诊断。因此,91妇女在24个月内清除这一比例被高估。另一篇文献是2008年发表于jnatlcerst题为《hpv的快速清除及持续性感染临床焦点的应用》的文章,我们认为这项来自哥斯达黎加纳入599例的800次高危型hpv检测阳性、入组时细胞学和组织学检查排除c2+的人群队列研究统计分析更合理。研究者每6个月随访1次共随访30个月,结论是感染一般快速清除,随访6个月和12个月时分别55(95ci52~59)和67(95ci63~70)的hpv感染清除;持续感染超过12个月、随访30个月时,<30岁妇女30个月hpv持续感染率为9(35393,95ci6~12)≥30岁妇女为21(86407,95ci17~25)。91这一数据与1998年发表于nengljd题为《年轻妇女宫颈hpv感染的自然转归》一致性高,研究入组608例年龄(20±3)岁的女大学生,调查其hpv感染的自然转归,结论是12个月时70妇女转阴,24个月仅9持续感染。
因此,2年91的清除率是限定在年龄<30岁的妇女中,>30岁妇女中79~80是一过性感染。说明hpv感染自然转阴率与年龄相关,当年轻妇女无法清除hpv时进入持续感染阶段,持续感染状态的妇女随着年龄增大比例增加,这是对年龄较大或性生活时间较长的妇女进行hpv检测更有意义的原因所在。
误区七:hpv检测适用于所有妇女
临床上应避免对<25岁的妇女进行hpv初筛,应在细胞学asc-时进行hpv分流。原因一:这个年龄段的妇女hpv感染率最高,但大部分(91)会在2年内自行清除病毒。原因二:宫颈癌多见于40岁以上妇女,持续高危型hpv感染到发生宫颈癌需要较长时间,从c发展为浸润癌一般需10~15年,但约25的患者5年内发展为浸润癌。2003—2004年,美国检测了1921例代表性妇女人群感染率,结果显示,14~59岁美国妇女hpv总感染率为268(95ci233~309),14~19岁妇女hpv感染率为245(95ci196~305),20~24岁妇女hpv感染率为448(95ci363~553),25~29岁妇女hpv感染率为274(95ci219~342),30~39岁妇女hpv感染率为275(95ci208~364),40~49岁妇女hpv感染率为252(95ci197~322),50~59岁妇女hpv感染率为196(95ci143~268)。因此,虽然fda批准bas对25岁以上妇女使用hpv进行宫颈癌初筛,我们的观点是对年龄<30岁妇女使用细胞学初筛和hpv分流的策略,即细胞学asc-妇女行hpv检测,30岁以上妇女可进行细胞学和hpv联合筛查。因此,对于<30岁的妇女,尤其<25岁,不宜轻易进行hpv检测,避免hpv一过性感染导至不必要的心理负担和家庭矛盾。同时,不应短期如3~6个月内反复检测随访人群的hpv,以减少hpv检测的过度使用,减轻患者负担。
总之,作为临床医生,我们要明确临床上hpv检测是用于查找宫颈病变,hpv检测值高低不代表病变严重程度,不应检测低危型hpv,要理解不同hpv检测技术对同一样本的检测结果可能不同,所有hpv检测方法均存在一定假阴性率,宫颈癌患者hpv检测结果可以为阴性,30岁以下(尤其是25岁以下)年轻妇女一过性hpv感染高达91,此时,hpv检测以分流细胞学异常者为目的,而30岁以上妇女既可采用细胞学筛查,也可采用hpv筛查,当然细胞学和hpv联合筛查效率最高。